重组促红细胞生成素（rhEPO）又称红细胞刺激因子，促红素是一种人体内源性糖蛋白激素，分子量36kd，等电点3.7~4.2。可刺激红细胞生成。用于治疗肾功能不全引起的贫血、获得性免疫缺陷综合征/艾滋病本身所致贫血或因治疗引起的贫血等贫血症状。
 

目前国内以CHO（中国仓鼠卵巢细胞）生产EPO的工艺为主，市面上相对成熟的纯化三步法有：1）蓝胶亲和层析-反相层析-离子交换层析；2）反相层析-离子交换层析-分子筛；3）蓝胶亲和层析-反相层析-分子筛。而EPO蛋白中的糖异构体的含量分布是影响安全性和有效性的重要因素。糖异构体的含量分布与纯化工艺有这紧密的联系，随着新产品的不断推陈出新，长效化技术也在进步，EPO市场份额逐渐变大，因此对纯化工艺也会提出更高的要求。

 

rhEPO 三步纯化工艺路线
 

 

纯化图谱：

 


  

纯化结果：

 

图1.SDS-PAGE纯化电泳图

 

电泳结果显示：UniGel-80Q 大量捕获rhEPO，再经过反相UniSil 30-300 C4去除宿主蛋白、内毒素等杂质；再用UniGel-80DEAE 低pH 洗杂，去除糖异构体；最后使用分子筛将培养上清中一部分与rhEPO疏水性、等电点极为接近的蛋白质去除。

 

、  

图2.毛细管等电聚焦电泳图

 

毛细管等电聚焦电泳结果显示：纯化后的rhEPO 的异构体分布包括异构体3-8，体内活性＞10万IU其分布符合欧洲药典标准。

 

订货信息 
 

 

关于纳微

 

 

苏州纳微科技股份有限公司是一家专门从事高精度、高性能和高质量微球材料研发和生产的国家高新技术企业，是全球能提供多品种多规格微球产品的公司之一。
 

公司致力于建设全球先进的纳米微球精准制备和应用平台，产品涵盖硅胶正相、反相、HILIC、手性填料，聚合物反相、离子交换、疏水层析、亲和层析（Protein A、金属螯合、苯-硼-酸）、固相萃取、凝胶渗透色谱及特殊功能填料；提供色谱柱、磁珠、标准颗粒、分析检测、分离纯化实验技能培训及分离纯化整体解决方案。

 

• 电话｜400-828-1622 

• 邮箱｜info@nanomicrotech.com